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問下倒置生物顯微鏡如何辨別壞死細胞呢?

信息分類:生命科學資訊    作者:yiyi發布 

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問下倒置生物顯微鏡如何辨別壞死細胞呢?

上海光學儀器廠回復:
細胞壞死與細胞凋亡:細胞死亡可分細胞壞死和細胞凋亡兩種,其作用機制如下

〈1〉細胞凋亡〈apoptisis〉:多細胞生物再胚胎發展過程、免疫調節及維持體內環境恆定中,必須藉由引發自殺的

機制來移除多馀或功能不全的細胞。這種機制因為受到遺傳基因的控制,故又稱程式性死亡〈programmed cell

death〉。惡劣的環境如過冷或是過熱、紫外線,缺氧或化學藥物等都可能使細胞傷害,啟動程式引發凋亡,可以

保護生物個體,避免細胞脫離控制,造成突長。細胞凋亡一旦發生,將會造成細胞核消失、DNA片段化、最后細

胞分解成許多具有完整細胞膜的凋亡小體〈cell bodies〉。由于細胞膜仍完整,因此其內所含有的細胞分解后有毒

物質并不會釋放,因此可避免週遭組織的發炎和傷害。這些凋亡小體很快會被週遭的吞噬細胞〈phagocytes〉或其

他細胞吸收。

〈2〉細胞壞死〈necrosis〉:通常是較嚴重的物理化學傷害所造成,主要是細胞通透性發生改變而膨脹或破裂,并

造成溶體〈lysosome 〉釋放出各種分解酵素和細胞激素〈cytokines〉等物質,而使週遭組織受傷引起發炎反應。

3. 水中污染物對人類細胞的影響:水中的污染物種類包含微生物,包括細菌、病毒、原生動物等;有機物,包

括各種揮發性有機物、合成有機物、消毒副產物、清潔劑、農藥等;無機物,包括各種重金屬、鹽類、氯、溶解

性固體物等。這些污染物對于人體的影響甚鉅,故藉由觀察細胞經污水處理后的改變,則可了解這些污染物對于

人類細胞的影響。
三. 材料

1. 細胞株:人類子宮頸癌細胞〈HeLa cell〉

2. 試劑:錐藍-用于染細胞

              Saponin-介面活性劑,可將細胞膜均勻打洞,使膜結構鬆散

              H2O2-可引起程式性死亡

             NaCl-配置生理食鹽水,0.9% NaCl為人的等張溶液

3. 待測樣本:外雙溪溪水

4. 器材:載玻片、蓋玻片、微量吸管、光學顯微鏡


1.細胞鮮活良好時:在倒置生物顯微鏡下,可以看到細胞透亮,呈自然伸展狀態。狀態不好時,細胞部分伸展,或飄浮,壞死的細胞有點發黑并飄浮。

2.懸浮細胞主要是根據細胞的透亮程度,狀態良好時,細胞透亮,狀態不好時,可見細胞有顆粒狀,發黑。

3.取部分細胞用4%的臺盼蘭染色,活細胞不著色,死細胞著色 
 

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